הקדמה

אין מאָדערנע ביאָמעדיצינישע און כעמישע לאַבאָראַטאָריעס,דיספּאָוזאַבאַל קולטור רערן זענען וויידלי געניצט אין צעל קולטור, כעמישע רעאַקציעס, מוסטער פּרעזערוויישאַן און אנדערע קריטיש אַפּעריישאַנז.זייער וויכטיקייט אין דעם עקספּערימענטאַלן פּראָצעס קען נישט איגנאָרירט ווערן. ווײַל די קולטור-רערן זענען אין דירעקטן קאָנטאַקט מיט די עקספּערימענטאַלע מוסטערן, וועט זייער מאַטעריאַל, גרייס, פֿאַרמאַכונג און אפילו צי זיי זענען סטעריליזירט צי נישט, האָבן אַ באַדײַטנדיקן השפּעה אויף די עקספּערימענטאַלע רעזולטאַטן. אומרעכטע אויסוואַל קען פֿירן צו קראָס-קאַנטאַמאַניישאַן, מוסטער-פֿאַרלוסט אָדער עקספּערימענטאַלע דאַטן-פֿאַראורטיילונג, און אַזוי אַפֿעקטירן די גענויקייט און רעפּראָדוצירבאַרקייט פֿון דער שטודיע.

הויפּט טיפּן פון דיספּאָוזאַבאַל קולטור טובז

עס איז דא א ברייטע קייט פון איין-מאל-ניצלעכע קולטור-רערן, און פארשער דארפן אויסקלויבן דעם ריכטיגן טיפ לויטן צוועק פונעם עקספערימענט, דער אפעראציע-אומגעבונג און די אייגנשאפטן פון די מוסטערן. זיי ווערן קאטעגאריזירט אין די פאלגנדע דריי אספעקטן: מאטעריאל, קאפאציטעט און ספעציעלע פונקציע:

1. קלאַסיפֿיקאַציע לויט מאַטעריאַל

איין-מאל-ניצלעכע קולטור-רערן געמאכט פון פארשידענע מאטעריאלן זענען אנדערש אין טעמפעראטור-קעגנשטעל, כעמישע פעסטקייט און אפטישע אייגנשאפטן:

• פּאָליפּראָפּילעןe: גוטע קעגנשטעל צו הויך טעמפּעראַטור און כעמישער קעראָוזשאַן, פּאַסיק פֿאַר רוטין צעל קולטור, מאָלעקולאַר ביאָלאָגי עקספּערימענטן און אנדערע אַפּלאַקיישאַנז.
• פּאָליסטירעןהויך טראַנספּאַרענץ, גרינג צו אָבסערווירן די פליסיק און צעל שטאַט, קאַמאַנלי געניצט אין אָפּטיש טעסטינג, אָבער נישט הויך טעמפּעראַטור קעגנשטעל, יוזשאַוואַלי קענען נישט זיין געניצט פֿאַר אַוטאָקלאַווינג.
• גלאָז קולטור רערןכאָטש זיי זענען ווידער-ניצלעך און כעמיש סטאַביל, זענען זיי טייַער, דאַרפן נאָך רייניקונג און סטעריליזאַציע פּראָוסידזשערז, און שטעלן אַ פּאָטענציעל ריזיקירן פון קראָס-קאַנטאַמאַניישאַן.

2. קלאַסיפֿיקאַציע לויט קאַפּאַציטעט

דעפּענדינג אויף די באַנד פון מוסטער וואָס איז נויטיק פֿאַר דעם עקספּערימענט, די קאַפּאַציטעט פון די קולטור רערן ריינדזשאַז פון מיקראָ צו גרויס וואַליומז:

• מיקראָצענטריפוגע רערןגעוויינטלעך געניצט פֿאַר מוסטער דיספּענסינג, סענטריפוגאַל אָפּזאַץ, דנאַ/רנאַ עקסטראַקציע און אַנדערע אַפּעריישאַנז.
• נאָרמאַל קולטור טובז: די מערסט גענוצטע קאַפּאַציטעט אין לאַבאָראַטאָריע, פּאַסיק פֿאַר צעל קולטור, מישונג רעאַקציע, מוסטער פּרעזערוויישאַן און אַנדערע צוועקן.
• גרויס-קאַפּאַציטעט קולטור טובזפּאַסיק פֿאַר גרויס-וואָג צעל קולטור אָדער גרויסע סומע פון ​​לייזונג פּראַסעסינג.

3. קלאַסיפֿיקאַציע לויט ספּעציעלע פֿונקציע

די רערן זענען בנימצא מיט אַ פאַרשיידנקייט פון נאָך פֿעיִקייטן צו טרעפן ספּעציפֿישע עקספּערימענטאַלע באדערפענישן:

• אַסעפּטישע פאַר-סטעריליזירטע טובזפֿאַבריק סטעריליזירט דורך גאַמאַ ראַדיאַציע אָדער אַוטאָקלאַווינג, פּאַסיק פֿאַר עקספּערימענטן מיט הויכע אַסעפּטישע באדערפענישן.
• מיט קאַרטרידזש קאַפּערמעגליכט גאז אויסטויש, פאסיג פאר מיקראארגאניזמען אדער צעל ליניעס וואס דארפן לופטונג און פארמיידט קאנטאמינאציע פון ​​עקסאגענע קוועלער.
• נידעריק טעמפּעראַטור קעגנשטעליק טובזקען זיכער גענוצט ווערן אין -80℃ אדער אפילו אין פליסיגע שטיקשטאף סביבה, פאסיג פאר לאנג-טערמין נידעריגע טעמפעראטור אויפהאלטונג פון ביאלאגישע מוסטערן.
• גראַדויִרטע/נישט-גראַדויִרטע רערןגראַדויִרטע רערן זענען באַקוועם פֿאַר שנעלע אָפּשאַצונג און דיספּענסינג פון פליסיק באַנד צו פֿאַרבעסערן די עפעקטיווקייט פון עקספּערימענטן.

שליסל פאַקטאָרן אין סעלעקטינג קולטור טובז

אין דעם פּראָצעס פון עקספּערימענטאַלן פּלאַן און אָפּעראַציע, איז די אויסוואַל פון פּאַסיקע איין-מאָל-ניצלעכע קולטור-רערן קריטיש וויכטיק צו ענשורן עקספּערימענטאַלע עפעקטיווקייט און אַקיעראַסי פון רעזולטאַטן. פאָרשער זאָלן דורכזיכטיק באַטראַכטן עטלעכע שליסל-פאַקטאָרן:

1. טיפ פון עקספּערימענט

די באדערפענישן פאר קולטור-רערן זענען באדייטנד אנדערש פון עקספערימענט צו עקספערימענט און זאלן אויסגעקליבן ווערן לויטן אינהאלט פון דער אפעראציע און דער עקספערימענטאלער סביבה:

• פֿאַר צעל קולטורדי באדערפענישן פֿאַר סטעריליטעט זענען גאָר הויך, און די נוצן פון סטערילע פאַר-סטעריליזירטע רערן מיט אָטעמבאַרע קאַרטרידזש קאַפּס צו ענשור גאַז אויסטויש איז רעקאָמענדירט.
• PCR / מאָלעקולאַרע ביאָלאָגיע עקספּערימענטןדאַרף זיין פריי פון דנאַ ענזימען, רנאַ ענזימען און פּיראָגען-פרייע רער, ניצט אָפט ריין-גראַד פּאָליפּראָפּילען רער.
• נידעריק טעמפּעראַטור סטאָרידזשרערן מיט גוטן נידעריגן טעמפּעראַטור קעגנשטעל זאָלן געניצט ווערן צו ויסמיידן ליזיס ביי נידעריגן טעמפּעראַטורן.

2. מוסטער קעראַקטעריסטיקס

די פיזיקאָכעמישע אייגנשאַפטן פון דער מוסטער האָבן אַ דירעקטן השפּעה אויף דער אויסוואַל פון מאַטעריאַל און פונקציאָנעלער קאָנפיגוראַציע פון ​​די קולטור-רערן:

• פליסיקע אדער האַרטע מוסטערןבאַשטימט דעם פארלאנגטן באַנד און די פאָרעם פון דער רער־עפענונג.
• זויערע אדער אלקאַלישע מוסטערןהעכסט קעראָוסיוו סאַמפּאַלז דאַרפן כעמיש קעגנשטעליק מאַטעריאַלס צו ויסמיידן רער דעפאָרמאַציע אָדער קאַנטאַמאַניישאַן.
• צי צו פֿאַרמייַדן ליכטליכט-סענסיטיוו מוסטערן זאָלן אויסקלײַבן אַמבער אָדער נישט-דורכזיכטיקע מאַטעריאַלן פֿאַר קולטור-רערן, כּדי צו פֿאַרמײַדן פֿאָטאָדעגראַדאַציע.

3. סטעריליזאַציע רעקווייערמענץ

די נויטווענדיקייט פֿאַר סטעריליזאַציע און די טיפּ סטעריליזאַציע געניצט זענען שליסל באַטראַכטונגען אין דער סעלעקציע פון ​​​​רער:

• פאַר-סטעריליזאַציע קעגן זעלבסט-סטעריליזאַציעפאַבריק פאַר-סטעריליזירטע פּראָדוקטן זענען פּאַסיק פֿאַר הויך-דורכפֿלוס עקספּערימענטן, שפּאָרנדיק צייט; אויב די לאַבאָראַטאָריע האט אַוטאָקלאַוו סטעריליזאַציע עקוויפּמענט, קענט איר קלייַבן PP רער וואָס קענען זיין אַוטאָקלאַווירט.
• סטעריליזאַציע קאָמפּאַטאַביליטילמשל, PS מאַטעריאַל איז נישט פּאַסיק פֿאַר אויטאָקלאַווינג און איז בלויז פֿאַר איין מאָל נוצן.

4. קאָמפּאַטאַביליטי

די רערן זאָלן זיין גוט צוגעפּאַסט צו די לאַבאָראַטאָריע עקוויפּמענט צו ענשור גלאַט אָפּעראַציע און פאַרלאָזלעך רעזולטאַטן:

• צענטריפוגאַל קאָמפּאַטאַביליטירערן געניצט פֿאַר צענטריפוגאַציע דאַרפֿן זײַן סטרוקטורעל שטאַרק צו וויטשטיין צענטריפוגאַל כוחות בײַ הויכע ראָטאַציע גיכקייטן.
• אויטאָמאַציע קאָמפּאַטאַביליטיפֿאַר עקספּערימענטן וואָס דאַרפן די נוצן פון פּיפּעטינג ראָבאָטן, אויטאָמאַטישע דיספּענסינג סיסטעמען, אאז"וו, מוזן סטאַנדאַרדיזירטע רער סיזעס ווערן גענוצט.

5. קאָסטן און סאַסטיינאַביליטי

גלייַכבארע קאָנטראָל פון קאָסטן און רעסורסן קאַנסאַמשאַן איז אויך אַ וויכטיקע באַטראַכטונג אין טרעפן עקספּערימענטאַלע באדערפענישן:

• איין-מאל-ניצלעך קעגן ווידער-ניצלעךאיין-מאל-ניצלעכע רערן זענען גרינג צו פירן און פארמיידן קאנטאמינאציע, פאסיג פאר הויך-דורכפיר עקספערימענטן; ווידער-ניצלעכע גלאז רערן זענען פאסיג פאר גרונטלעכע עקספערימענטן מיט א באגרענעצטן בודזשעט.
• קויפן וואָגגרויסע קויפן קענען רעדוצירן דעם איינצל פרייז, פּאַסיק פֿאַר לאַנג-טערמין, גרויס-וואָג פּראָיעקטן; קליינע, קאַסטאַמייזד ספּעסיפיקאַציעס זענען מער פלעקסאַבאַל אָבער לעפיערעך הויך קאָסטן.

רעקאָמענדאַציעס פֿאַר געוויינטלעכע אַפּליקאַציע סצענאַרן

לויט די ספּעציפֿישע באַדערפֿנישן פֿון פֿאַרשידענע טיפּן עקספּערימענטן, ווערן די פֿאָלגנדיקע אָפּוואַרפֿבאַרע קולטור־רערן רעקאָמענדירט פֿאַר עטלעכע געוויינטלעכע אַפּליקאַציע־סצענאַרן, מיטן ציל צו פֿאַרבעסערן די עפֿעקטיווקייט און פֿאַרלעסלעכקייט פֿון עקספּערימענטן:

1. צעל קולטיוואַציע

• רעקאָמענדירטער טיפּסטערילע פּאָליפּראָפּילען קולטור רערן מיט אָטעמבאַרע קאַרטרידזש קאַפּס
• סיבהפּאָליפּראָפּילען מאַטעריאַל האט גוטע כעמישע אינערטקייט און ביאָקאָמפּאַטיביליטי, פּאַסיק פֿאַר צעל קולטור פליסיקייט. די קאַרטרידזש דעקל קען דערגרייכן עפעקטיוו גאַז וועקסל, פאַרמייַדן מיקראָביאַל קאַנטאַמאַניישאַן, און טרעפן די גאַז סוויווע פארלאנגט פֿאַר צעל פּראָליפעריישאַן.

2. PCR/qPCR מאָלעקולאַרע רעאַליזאַציע

• רעקאָמענדירטע טיפּןנוקלעאז-פֿרײַע, פּיראָגען-פֿרײַע ספּעציאַליזירטע PCR רערן אָדער מיקראָצענטריפוגע רערן
• סיבההויך-ריינקייט פּאָליפּראָפּילען רערן, נאָך שטרענגער באַהאַנדלונג, קענען עפעקטיוו פאַרמייַדן מוסטער דעגראַדאַציע אָדער קאַנטאַמאַניישאַן, צו ענשור פּינטלעך און פאַרלאָזלעך אַמפּליפיקיישאַן רעזולטאַטן. דין-וואַנט פּלאַן איז רעקאַמענדיד צו פֿאַרבעסערן היץ אַריבערפירן עפעקטיווקייַט.

3. נידעריק טעמפּעראַטור סטאָרידזש

• רעקאָמענדירטער טיפּנידעריק טעמפּעראַטור קעגנשטעליק פּאָליפּראָפּילען טובינג מיט אַנטי-פריז קראַקינג פּלאַן און שרויף סילינג קאַפּ
• סיבהדי רערן קענען גענוצט ווערן צו האַלטן מוסטערן פֿאַר לאַנגע פּעריאָדן ביי -80°C אָדער אפילו אין פליסיקן שטיקשטאָף, און די ספּעציעלע סטרוקטור פאַרהיט די רער פון שוואַכקייט און מוסטער ליקאַדזש. פּאַסיק פֿאַר לאַנג-טערמין סטאָרידזש פון צעל ליניעס, בלוט מוסטערן, פּראָטעאינען אָדער נוקלעיק זויערן.

4. צענטריפוגע

• רעקאָמענדירטע טיפּןהויך-טאָלעראַנץ פּאָליפּראָפּילען רערן, קייַלעכיק אָדער קאָניקאַל דנאָ פּלאַן, מיט סענטריפוגע ראָוטערז
• סיבהפּפּ רערן האָבן גוטע צענטריפוגאַל קעגנשטעל און קענען אויסהאַלטן הויכע צענטריפוגאַל כוחות אָן דעפאָרמאַציע אָדער ריס. דער קאָנישער דנאָ העלפט צו זאַמלען צעלן אָדער פּרעסיפּיטאַטן אין צענטער און פאַרגרעסערן די אָפּזוך קורס.

געוויינטלעכע טעותים און וועגן צו זיי אויסמיידן

אין פּראַקטיק, עקספּערימענטאַלע דורכפאַלן צוליב אומריכטיקער אויסוואַל פון קולטור-רערן פּאַסירן פון צייט צו צייט. עטלעכע געוויינטלעכע טעותים און קאָרעספּאָנדירנדיקע פֿאָרשלאָגן פֿאַר לייזונגען זענען ליסטעד אונטן פֿאַר די פֿאָרשערס רעפֿערענץ:

1. מיסברויַך פון נישט-הויך טעמפּעראַטור קעגנשטעליק מאַטעריאַלן פֿאַר אַוטאָקלאַווינג